CDK廣譜抑制劑正在熱銷的產(chǎn)品：P(Human Growth Hormone Binding Protein) ELISA Kit 人生長激結(jié)合蛋白聚氧烯20油 average Mn ~1,150
ADM(Human adrenomedullin) ELISA Kit 人腎上腺髓質(zhì)2-溴-3-吡啶 97%
irGH(Human Immunoreactive growth hormone) EL
中文名稱：CDK廣譜抑制劑
英文名稱：Flavopiridol Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10773
產(chǎn)品介紹:
Flavopiridol Hydrochloride是一種CDK的廣譜抑制劑，與ATP競爭性地抑制CDK1，CDK2和CDK4的活性，IC50值分別為30,170,100nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：131740-09-5 別名：HL 275;NSC 649890;MDL 107826A;FLAVOPIRIDOL HCL;Alvocidib Hydrochloride 純度：98.95% 分子量：438.3 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
柴油食烷菌(親和純化) 牛IgGAnti-ISL2 Antibody人抗型肝炎病抗體(anti-HCV)
細麗外擔(dān)菌熒光標(biāo)記牛血清白蛋白Anti-ITGA2 Antibody人抗型肝炎病抗體(anti-HCV)
核盤菌羅丹明標(biāo)記牛血清白蛋白Anti-ITPKA Antibody人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)
Phaeobotryon羅丹明標(biāo)記狗IgMAnti-ITGAD Antibody人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)
Microbacterium halotolerans熒光Cy3標(biāo)記狗IgMAnti-ITIH2 Antibody人單核增多性李斯特菌O((LLO)
釀酒酵母熒光PE標(biāo)記狗IgGAnti-ITPK1 Antibody人單核增多性李斯特菌O((LLO)
黑曲霉兔抗熒光Anti-ITPKC Antibody人乙型肝炎病X抗原(HBxAg)
巧克力糖霉菌羊IgGAnti-JAK2 Antibody人乙型肝炎病X抗原(HBxAg)
黃曲霉辣根過氧化物標(biāo)記羊抗人IgAAnti-ITPKB Antibody人腺相關(guān)病(AAV)
冠突曲霉熒光APC標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)Anti-JAK1 Antibody人腺相關(guān)病(AAV)
鞘單胞菌（加詞待譯）羅丹明標(biāo)記Anti-JAK2 Antibody人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)
無花果曲霉(免疫親和純化)人IgMAnti-JAKMIP2 Antibody人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)
枯草芽孢桿菌兔抗HRPAnti-JAK3 Antibody人傷寒抗原(St-Ag)
秀珍菇(親和純化) 人IgGAnti-JAK2 Antibody人傷寒抗原(St-Ag)
短小芽孢桿菌(親和純化) 人分泌型IgAAnti-JAM A pY280 Antibody人類嗜T淋巴Ⅰ型病(HTLV-Ⅰ)
釀酒酵母生物化人IgGAnti-JMJD5 Antibody 人類嗜T淋巴Ⅰ型病(HTLV-Ⅰ)
環(huán)指蛋白40抗體匍匐放射毛霉或雅致放射毛霉HCMEC人心臟微血管內(nèi)皮細胞
環(huán)指蛋白8抗體李克犁頭霉（傘枝梨頭霉）人急性早幼粒白血病細胞
細胞衰老抑制基因蛋白抗體皮狀絲孢酵母大鼠垂體瘤細胞
中間絲相關(guān)蛋白抗體貝雷絲孢酵母人急性髓細胞性白血病細胞
CDK廣譜抑制劑肉色栓 半固體營養(yǎng)瓊脂低氧誘導(dǎo)因子-1α
擬莖點霉屬 麥芽汁培養(yǎng)基對氧磷1
冬蟲夏草 雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基多巴
莓實假單胞 遠藤氏瓊脂二氧化
豬丹絲 月桂基硫鹽蛋白胨肉湯-MUG肥大類胰蛋白
松杉靈芝 MFC肉湯肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A
枯草芽孢桿 馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B
根瘤 馬鈴薯葡萄糖水肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C
松鼠葡萄球 綜合馬鈴薯培養(yǎng)基肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D
曲霉 胰酪胨大豆多粘肉湯基礎(chǔ)分泌型球蛋白A
綠色木霉 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）鈣蛋白
草假單胞 CIN培養(yǎng)基鈣調(diào)磷調(diào)節(jié)蛋白1
黑曲霉 波爾頓選擇性肉湯甘油三酯
貓埃菲比體 紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基肝化血漿總脂解
德爾布有孢酵母 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液肝結(jié)合性表皮生長因子
