PD 98,059(MAPKK抑制劑)正在熱銷的產(chǎn)品：Integrin AlphaE2/CD103 /FITC 熒光標(biāo)記整合αE2抗體IgG吡啶 光譜級(jí), ≥99.5% (GC)
Integrin alpha E2 /FITC 熒光標(biāo)記整合alpha E2 抗體IgG酯 Standard for GC,≥99.5%(GC)
Integrin AlphaM/CD11b /FITC 熒光標(biāo)記巨噬
產(chǎn)品介紹:
英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：2mg PD98059是一種非ATP 競爭性的MEK 抑制劑，IC50為2 μM，特異性抑制MEK-1介導(dǎo)的MAPK 激活；不直接抑制ERK1或ERK2。 |
中文名稱：PD 98,059(MAPKK抑制劑)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：2mg
貨號(hào)：FS-X10246
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
香栓菌Hib乙酰水解抗體Human MUC20(Mucin-20) 大鼠Bκ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)免疫試劑盒
少根根霉原變種腫瘤異常甲基化蛋白1抗體Human SKAP2 大鼠Bκ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫試劑盒
芽孢桿菌腫瘤異常甲基化蛋白2抗體Human SIGMAR1 大鼠B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌缺氧誘導(dǎo)因子脯酰羥化4抗體Human SIL1 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)免疫試劑盒
少根根霉人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體Human SIKE1 大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)免疫試劑盒
蟲草Beta基己糖beta亞基蛋白B鏈抗體Human SHOX 大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)免疫試劑盒
黃曲霉HEXIM2蛋白抗體Human SIM2 大鼠Apelin(APLN)免疫試劑盒
松果鏈霉菌3'-5'外切1蛋白抗體Human SHMT2 大鼠apelin 13(AP13)免疫試劑盒
黑馬朗假絲酵母型肝炎病NS5B抗體Human SHROOM1 大鼠apelin 12(AP12)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體Human SH3GL3 大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)免疫試劑盒
間型假絲酵母HEG同源蛋白1抗體Human MUC20(Mucin-20) 大鼠ADM2(ADM2)免疫試劑盒
雷丸菌人腫瘤抑制蛋白抗體Human SHANK1 大鼠8異前列腺F2α(8-iso-PGF2a)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Hemk甲基轉(zhuǎn)移家族1號(hào)蛋白抗體Human SH3GL2 大鼠8異前列腺(8-iso-PG)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Hemk甲基轉(zhuǎn)移家族2號(hào)蛋白抗體Human SH3PXD2A 大鼠8-異構(gòu)前列腺F2α(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒
石楠炭疽病菌HEN1甲基轉(zhuǎn)移同源蛋白1抗體Human SHARPIN(Sharpin) 大鼠8羥基脫氧鳥(8-OHdG)免疫試劑盒
白假絲酵母缺氧誘導(dǎo)基因2蛋白抗體Human SHD 大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)免疫試劑盒
產(chǎn)堿假單胞菌Pseudomonas│alcaligenes 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%原花青B2
沃氏富鹽菌Haloferax│volcanii 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%澤瀉B醋酯
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%肉豆蔻木脂
PD 98,059(MAPKK抑制劑)褐孢大禿馬勃 3-氨基-2,6-二氟甲酯分泌型球蛋白E
微小桿 3--4-三氟甲基芐草酰乙
香菇 N-羥基叔丁酯β-防御2
鏈霉 6-甲甲酯生物
矮小傘枝霉 3--2-羧甲酯球蛋白EFc段受體I
大腸埃希 1,4-苯二乙二乙酯甘油三脂
單梗頭孢霉屬 甲基谷胎球蛋白B
毛尖蘑 cortienic acid乙腦特異性抗體
Virgibacillus 3-基-4-孔肯尼亞病抗體
綠色木霉 7--1H-吡咯并[3,2-b]吡啶蛋白激A
枯草芽孢桿 水楊基熒光酮諾如病
簡單青霉 4--6,7－二甲氧基喹啉胱硫分解
釀酒酵母 八氟戊GRO;KC
釀酒酵母 全氟己烷β-羥丁
枯草芽孢桿 五氟血管緊張Ⅱ受體1
