USP7/USP47抑制劑(USP7/USP47 inhibitor)正在熱銷的產(chǎn)品：Collagenase I ELISA Kit 大鼠膠原I間二苯 99%
P-PKC ELISA Kit 大鼠化蛋白激C二二二 98%
pERK ELISA Kit 大鼠化外信號調(diào)節(jié)激二二二 for HPLC, ≥99%
cath-K ELISA Kit 大鼠組織蛋白K二二 standard for GC
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
中文名稱：USP7/USP47抑制劑(USP7/USP47 inhibitor)
英文名稱：USP7/USP47 inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10916
產(chǎn)品介紹:
USP7/USP47inhibitor是USP7/USP47的抑制劑，IC50分別為0.42uM和1.0uM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1247825-37-1 純度：98.17% 分子量：484.4 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
類干酪乳桿菌人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3Anti-Wnt1 Antibody小鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)
新疆黃桿菌人視黃結(jié)合蛋白Anti-WEE2 Antibody小鼠白介1α(IL-1α)
麥根腐平臍蠕孢人8羥基脫氧鳥Anti-WTAP Antibody小鼠白介1α(IL-1α)
綠僵菌人羥賴Anti-WRNIP1 Antibody小鼠白介2(IL-2)
擬青霉屬人GTP活化蛋白Anti-XPA Antibody小鼠白介2(IL-2)
副豬嗜血桿菌人載脂蛋白HAnti-XPA Antibody小鼠白介4(IL-4)
釀酒酵母人糖磷脂酰肌Anti-XPO4 Antibody小鼠白介4(IL-4)
變灰尾孢菌人美洲商陸Anti-XRCC2 Antibody小鼠白介6(IL-6)
雅氏艾美耳球蟲人脂多糖/內(nèi)Anti-XRCC6 Antibody小鼠白介6(IL-6)
彎曲芽胞桿菌人preptinAnti-XRCC6 Antibody小鼠白介9(IL-9)
球孢白僵菌人過氧化物體增殖物激活受體αAnti-YARS Antibody小鼠白介9(IL-9)
大腸埃希菌人載脂蛋白EAnti-XRN2 Antibody小鼠苗條受體(LR/Ob-R)
冬克青霉人成骨生長肽Anti-YEATS2 Antibody小鼠苗條受體(LR/Ob-R)
Sphingomonas oligoaromativorans人破骨分化因子Anti-YBOX2 Antibody小鼠瘦(LEP)
枯草芽孢桿菌人羥基膠原吡啶交聯(lián)Anti-YOD1 Antibody小鼠瘦(LEP)
黑木耳人脫氧膠原吡啶交聯(lián)Anti-YTHDF1 Antibody小鼠白血病抑制因子(LIF)
癌基因VAV2抗體皺褶革菌中國倉鼠肺細(xì)胞
囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B黃斑紅菇人類成纖維細(xì)胞系
絲/蘇特定蛋白磷抗體褐黃鱗銹耳大鼠肝細(xì)胞
血管生長因子VG5Q抗體鉛色短孢牛肝菌小鼠X小鼠
USP7/USP47抑制劑(USP7/USP47 inhibitor)大腸埃希氏 銀、砷、鉍、鉻、銅、鐵、鎂、錳、鎳、鉛、鈀、銻、硅/Ag, As, Bi, Cr, Cu, Fe,過氧化物體增殖物激活受體
熒光假單胞 鋁、砷、鉍、鎘、銅、鐵、鉛、鈀、銻、硒、錫、碲、鋅/Al, As, Bi, Cd, Cu, Fe,核轉(zhuǎn)錄因子
變幻青霉 鋁、砷、鉍、鎘、銅、鐵、鉛、鈀、銻、硒、錫、碲、鋅/Al, As, Bi, Cd, Cu, Fe,8羥基脫氧鳥
Hypoxylon perforatum 銀、鋁、、鋇、鈣、、鋰、鎂、鈉、鎳、銻、硒、錫/Ag, Al, B, Ba, Ca, K, Li可溶性環(huán)氧化物水解
根霉 砷、鋇、鈷、鉻、銅、鐵、錳、鎳、鉛、錸、銻、硒、錫、碲/As, Ba, Co, Cr, Cu, Fe皮質(zhì)
委內(nèi)瑞拉鏈霉菊糖變 、鋇、鎘、鈷、銅、鐵、錳、鉬、鎳、鉛、銻、鈦、釩、鋅/B, Ba, Cd, Co, Cu, Fe,葡萄糖
裂褶 鋁、鈣、鉻、銅、鐵、鎂、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、錫、釩、鋅/Al, Ca, Cr, Cu, Fe, Mg封閉蛋白
德爾布有孢圓酵母 鋁、鈣、鎘、鉻、銅、鐵、、鎂、錳、鈉、鎳、鉛、釩、鋅/Al, Ca, Cd, Cr, Cu, Fe補(bǔ)體蛋白3
糖化酵母 鋁、、鈣、鉻、銅、鐵、鎂、錳、鎳、磷、鉛、硒、硅、鋅/Al, B, Ca, Cr, Cu, Fe,γ-分泌
羅倫隱球酵母 鋁、、鋇、鈣、鉻、銅、鐵、、鋰、鎂、錳、鈉、磷、鈦/Al, B, Ba, Ca, Cr, Cu,髓過氧化物
氏解硫芽孢桿 鋁、砷、鉍、鎘、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉛、銻、硅、錫、鋅/Al, As, Bi, Cd, Cu, Fe白介4
蟹味菇 鑭、鈰、鐠、釹、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥、釔/La, Ce, Pr, Nd, Sm,緊密連接蛋白1
黃海黃色彎曲 鑭、鈰、鐠、釹、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥、釔/La, Ce, Pr, Nd, Sm,粘蛋白2
三方氏酵母 砷、鋇、鈷、鉻、銅、鐵、錳、鎳、鉛、錸、銻、硒、錫、碲、鋅/As, Ba, Co, Cr, Cu,緊密連接蛋白
蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 砷、鋇、鈹、鈷、鉻、銅、鐵、錳、鎳、鉑、銻、硒、錫，碲、鋅/As, Ba, Be, Co, Cr,β-防御
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
