Lck/Src抑制劑(WH-4-023)正在熱銷的產(chǎn)品：p53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit 小鼠p53無(wú)水 AR，98%
cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 小鼠環(huán)鳥無(wú)水
NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠一氧化氮合成三化鐵
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱：Lck/Src抑制劑(WH-4-023)
英文名稱：WH-4-023
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號(hào)：FS-X11015
產(chǎn)品介紹:
WH-4-023是一種有效的選擇性的Lck/Src抑制劑，IC50分別為2nM/6nM，對(duì)p38α和KDR作用效果稍弱。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：837422-57-8 別名：Dual LCK/SRC inhibitor 純度：99.47% 分子量：568.67 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
紅色蠟?zāi)?/span>Pseudomonas fluorescens大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)
黑根霉Pseudomonas fluorescens大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
根霉Pseudomonas fluorescens大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)
阿舒多囊霉Pseudomonas fluorescens大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)
蓋氏假單胞菌Pseudomonas fluorescens大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
伯克霍爾德氏菌屬Pseudomonas fluorescens大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
膠孢Pseudomonas fluorescens大鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)
生活飲用水 大腸埃希氏菌Pseudomonas fluorescens大鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)
青霉 Pseudomonas fluorescens大鼠血管緊張?jiān)?aGT)
類銀白紫絲膜菌Pseudomonas fluorescens大鼠血管緊張?jiān)?aGT)
Pseudomonas fluorescens大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)
黑木耳Pseudomonas fluorescens大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)
損蘑菇紫色桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠二(MDA)
枯草芽胞桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠二(MDA)
洛斯里被毛孢Pseudomonas fluorescens大鼠超氧化物歧化(SOD)
蛋白酪磷-1B抗體芒果囊孢菌屬過(guò)氧化氫(CAT)比色法測(cè)試盒
野生型P53誘導(dǎo)基因1單克抗體紅褐肉座菌過(guò)氧化物(GSH-Px)比色法測(cè)試盒
蛋白質(zhì)精甲基轉(zhuǎn)移1抗體松色二胞菌過(guò)氧化物(POD)比色法測(cè)試盒(測(cè)植物)
磷化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體柳屬半明小黑腐皮殼菌抗壞血過(guò)氧化物(APX)比色法測(cè)試盒
Lck/Src抑制劑(WH-4-023)地衣芽孢桿 BOC-L-天門冬β-芐酯
紫色紅曲霉 竹紅
毛木耳 芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-天冬酰
土曲霉原變種 4',5,8-三羥基-3',6,7-氧基黃酮
蠟狀芽孢桿 延命草
維氏氣單胞 BOC-N-β-Trityl-L-天門冬酰
新生隱球 疏展香茶菜寧B
芹側(cè)耳（杏鮑菇） Nα-FMOC-Nω-PBF-D-精
苔蘚隱球酵母 8-羥基松脂
乳桿屬 小構(gòu)樹A
蘇云金芽孢桿 5,7-二甲氧基-3,3',4'-三羥基黃酮
泡盛曲霉 (-)-表松脂
短桿狀馬賽 環(huán)桑
屎腸球 植鈣
細(xì)黃鏈霉 (-)-二氫槲皮
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
