SGK抑制劑(GSK 650394)正在熱銷的產(chǎn)品：CS ELISA Kit 大鼠檸檬合槐豆膠
L-LDH ELISA Kit 大鼠L-鼠乳脫氫1-丁吡啶鹽鹽 98%
ACS ELISA Kit 大鼠脂酰合成芐氫氧化 25%水溶液
CACT ELISA Kit 大鼠肉脂酰轉(zhuǎn)移芐氫氧化 40%溶液
pACCase ELISA Kit 大鼠化酰羧化1-吡啶鹽鹽 98%
MT ELISA
產(chǎn)品介紹:
GSK650394是一種新穎的SGK抑制劑，在SPA實(shí)驗(yàn)中，對(duì)SGK1和SGK2的IC50分別為62nM和103nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：890842-28-1 純度：99.38% 分子量：382.45 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：SGK抑制劑(GSK 650394)
英文名稱：GSK 650394
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號(hào)：FS-X10906
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
頂青霉人異腎上腺Anti-TRAF3IP3 Antibody人伴侶蛋白(CPN)
白靈側(cè)耳大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3Anti-TRAF5 Antibody人纖調(diào)蛋白(FMOD)
干酪乳桿菌人胰抑制Anti-TRAPPC3 Antibody人纖調(diào)蛋白(FMOD)
枯草芽胞桿菌枯草亞種大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子Anti-TRAPPC6A Antibody人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)
鞘菌屬大鼠巨噬炎性蛋白3αAnti-TRERF1 Antibody人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)
釀酒酵母人雄激受體Anti-TRARG1 Antibody人網(wǎng)膜(omentin)
氏假單胞菌大鼠層連蛋白/板層Anti-TREM1 Antibody人網(wǎng)膜(omentin)
流感嗜血桿菌人松弛肽/松弛Anti-TRBC1 Antibody人基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)
熒光假單胞菌大鼠白介6Anti-TRHR Antibody人基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)
畫眉草彎孢人生長(zhǎng)激結(jié)合蛋白Anti-TRIL Antibody人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶(MAT)
蠟狀芽孢桿菌人腎上腺髓質(zhì)Anti-TRIM16 Antibody人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶(MAT)
松口蘑大鼠白介4Anti-TRHR Antibody人螺旋肽(THP)
樹舌3-1人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激Anti-TRIM29 Antibody人螺旋肽(THP)
松口蘑（可定）人硫褪黑色Anti-TRIM59 Antibody人溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)
Bacillus 大鼠白介1αAnti-TRIM25 Antibody人溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)
產(chǎn)黃青霉人長(zhǎng)效甲狀腺激Anti-TRIM24 Antibody人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)
泛蛋白連接G2抗體小豆殼二胞抗人BCS1-like小鼠7
泛蛋白連接L3抗體#膠質(zhì)芽孢桿菌抗SARS病毒N蛋白小鼠7
泛蛋白連接2N抗體禾谷絲核菌抗人IgA7
泛蛋白連接E3抗體姬松茸（斜面）抗赭曲霉毒A7
SGK抑制劑(GSK 650394)曲霉 氟、、硝根、硝根、硫根/F, Cl, NO3, PO4, SO4乙酰CoA羧化2
總狀共頭霉 氟、、亞硝根、硝根、硫根/F, Cl, NO2, NO3, SO4碳酐
凍干粉 克羅諾桿屬（阪崎腸桿）（陽(yáng)性） 氟、、亞硝根、硝根、硫根/F, Cl, NO2, NO3, SO4超氧化物歧化1
光滑青霉 銅、鐵、錳、錫、鋅/Cu, Fe, Mn, Sn, Zn肺炎支原體特異性SIgA抗體
大腸埃希氏 鈰、鈷、鋰、鈦、釔 /Ce, Co, Li, Ti, Y纖維二糖
微黃棒桿 鎘、銅、鎳、鉛、鋅/Cd, Cu, Ni, Pb, Zn膽固?；D(zhuǎn)移
灰離褶傘(松毛菇) 鎘、銅、鐵、錳、鉛/Cd, Cu, Fe, Mn, Pb脂肪甘油三酯脂
宇佐美曲霉 鎘、鉻、汞、鉛、硒/Cd, Cr, Hg, Pb, Se3-羥基3-甲基戊二酰還原
大腸埃希氏 鈣、、鎂、鈉、/Ca, K, Mg, Na, NH4血管活性腸肽
假單胞屬 鉍、鍺、銦、鈧、釔/Bi, Ge, In, Sc, Y膽固7α羥化
釀酒酵母 鉍、銅、鐵、鉛、銻/Bi, Cu, Fe, Pb, Sbc-肽
油菜假單胞 2-甲基-1-苯基-2-傳染性胃腸炎病IgA抗體
大腸埃希氏 鉍、鎘、銅、鐵、銦/Bi, Cd, Cu, Fe, In脂肪甘油三酯脂
熒光假單胞 5-三氟甲基膽固酰基轉(zhuǎn)移
炭黑曲霉 鉍、鈣、汞、鎂、錫/Bi, Ca, Hg, Mg, Sn3-羥基3-甲基戊二酰還原
