AO/EB雙熒光染色試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品：L-Citrulline L-瓜氨抗體4-哌啶哌啶 98%
Lck/p56-LCK 淋巴特異性蛋白酪氨激抗體3-奎寧環(huán)酮鹽鹽 99%
Phospho-Lck (Tyr505) 化淋巴特異性蛋白酪氨激抗體六代鉑鈉六水合物 Pt 34.0%
LDL 低密度脂蛋白抗體2'-氨苯酮 97%
LDL-R 低密度脂蛋白受體抗體2-酮 95%
ox-LDL
中文名稱：AO/EB雙熒光染色試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100T
貨號：FS-X9893
產(chǎn)品介紹:
用途： 檢測細胞凋亡 注意事項： 細胞死亡判斷的生物化學方法，橙(AO)能透過活細胞膜，嵌入細胞核DNA，使之發(fā)出明亮的綠色熒光。溴乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發(fā)紅光?；罴毎示G色熒光，死細胞呈橙色熒光。試劑盒主要有AO染色液、EB染色液組成。 儲存條件：4℃，避光，6個月 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
乳酒假絲酵母α1,4-N-乙酰葡糖轉(zhuǎn)移α4Gn-T抗體Human KTN1 小鼠微管蛋白β3(TUBB3)免疫試劑盒
南海區(qū)交替紅色桿菌芳香乙酰脫乙?；贵wHuman LAMR1/RPSA 小鼠網(wǎng)膜(omentin)免疫試劑盒
路氏腸桿菌芳香乙酰脫乙?；鶚拥鞍?/span>4抗體Human LANCL1 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌基乙二半脫氫磷泛酰巰基乙轉(zhuǎn)移抗體Human Langerin 小鼠脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)免疫試劑盒
融粘帚霉賴戊二還原抗體Human KRT81 小鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)免疫試劑盒
F56（蘑菇）錨蛋白重復(fù)域6抗體Human KRT80 小鼠脫氫表雄(DHEA)免疫試劑盒
黃薄芝精2抗體Human KRT6B 小鼠褪黑(MT)免疫試劑盒
食芽胞桿菌固還原家族1成員C3抗體Human KPNA5 小鼠突觸融合蛋白2(STX2)免疫試劑盒
大腸埃希菌促腎上腺皮質(zhì)激受體Human KPNA4(Karyopherin subunit alpha-4) 小鼠突觸融合蛋白1A(STX1A)免疫試劑盒
肉色曲霉褐黑相關(guān)蛋白ART抗體Human KPNA6(Karyopherin subunit alpha-6) 小鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒
中溫富鹽菌腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體Human KPTN 小鼠透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
深褐褶菌Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體Human KRAP/SSFA2 小鼠銅藍蛋白(CP/CER)免疫試劑盒
中國臺灣根霉腺相關(guān)病5 VP1抗體Human KRAS(GTPase KRas) 小鼠同型半胱(Hcy)免疫試劑盒
禽腺病Ⅶ型脂肪脫氫抗體Human KLHDC5 小鼠鐵調(diào)(Hepc)免疫試劑盒
木賊鐮孢抗利尿激1A抗體Human KRR1 小鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒
富養(yǎng)羅爾斯通氏菌抗利尿激受體1B抗體Human KRI1 小鼠天門冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
: AS3.2835資源名稱: 串珠鐮孢 質(zhì)量規(guī)格：BR白三烯C4試劑盒8-香葉草氧基補骨脂
杉木假單胞菌Pseudomonas│cunninghamiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR白三烯B4試劑盒熊果乙酯
堅強芽孢桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格：分子生物學級白介增強子結(jié)合因子2試劑盒細辛
AO/EB雙熒光染色試劑盒皮傘 2-(4-溴基)過氧化物
波那雷恩沙門氏 L-2,4-二苯脂蛋白相關(guān)磷脂A2
運動節(jié)桿 辛甲酯纖溶原激活物抑制因子2
雅致小克銀漢霉 二二甲,異構(gòu)體混合物基質(zhì)金屬蛋白2
蟬花1-9 2,2'-氧二乙內(nèi)皮分泌蛋白 SCUBE2
枯草芽胞桿 苯黑腺病
氧化微桿 4-芐基哌鹽鹽副流感病IgM抗體
淤泥大洋芽孢桿 谷維呼吸道合胞病
釀酒酵母 N,N′-乙撐雙硬脂酰膠原蛋白三螺旋重復(fù)包含蛋白1
毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 4-氨基-3,5-二氟苯晶狀體球蛋白αB
金針菇 鹽多奈哌齊維生K
穿孔假單胞 (3S,4R)-4-(4-氟苯基)-3-羥甲基-1-甲基HLAⅡ類組織相容性抗原DP鏈
嗜淀粉乳桿 亞甲基氨基乙HLAⅡ類組織相容性抗原DQ鏈
枯草芽孢桿 16,17-環(huán)氧脫氧核糖核13
鏈格孢 N,N-二甲基-3-日本腦炎病IgM抗體
