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PCNA細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)

參考價
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  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-05-09
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限8
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9988
  • 人氣值266597
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!


公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。






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貨號FS-X9607
PCNA細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)公司正在出售的產(chǎn)品:土壤an態(tài)氮測試盒 規(guī)格:100管/96樣 測試方法:微量法
土壤an態(tài)氮測試盒 規(guī)格:50管/48樣 測試方法:可見分光光度法
土壤硝態(tài)氮測試盒 規(guī)格:100管/96樣 測試方法:微量法
土壤硝態(tài)氮測試盒 規(guī)格:50管/48樣 測試方法:可見分光光度法
土壤漆mei測試盒 規(guī)格:100管/48樣 測試方法:微量法
土壤
PCNA細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法) 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品介紹:

PCNA 細(xì)胞增殖檢測試劑盒(細(xì)胞免疫熒光法/流式細(xì)胞儀檢測),PCNA是細(xì)胞DNA 多聚酶的“δ”輔助蛋白,是真核細(xì)胞DNA 合成時所必需的一種酸性核蛋白。PCNA 在細(xì)胞核內(nèi)合成,并儲存在核內(nèi),細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài)時,其含量很低,當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入增殖周期中,其表達(dá)明顯增加,故PCNA 的表達(dá)高低可反映細(xì)胞增殖的活躍程度。

操作方法

1. 在適的環(huán)境下培養(yǎng)細(xì)胞。

2. 除去培養(yǎng)液,用PBS 洗一次。

3. 胰蛋白處理和收集細(xì)胞,離心,(注意1)保證每管細(xì)胞數(shù)在106 個。

4. 用0.3 ml PBS 輕輕的重懸細(xì)胞, 然后慢慢加入0.7 ml 預(yù)冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混勻。在4°C 至少1h。(注意2)

5. 沉淀細(xì)胞,*吸去上清。

6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗細(xì)胞2 次。

7. 用100μl 抗體孵育液(0.5% Tween-20/1%BSA/PBS)重懸細(xì)胞,加入1ul PCNA 抗體(1μg/106 cells),室溫孵育1 小時。

8. 離心收集細(xì)胞,用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。

9. 離心收集細(xì)胞,用50μl 抗體孵育液重懸,加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC,室溫孵育30 分鐘。離心收集細(xì)胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。

10. 用含有終濃度為10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS(pH7.4)重懸細(xì)胞。

11. 避光使細(xì)胞在室溫下孵育20min 后,離心收集細(xì)胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后,轉(zhuǎn)移至流式檢測管中重懸。

12. FACS 檢測或者儲存于4℃。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

PCNA細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)

PCNA cell proliferation Detection Kit

20T

FS-X9607

 

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

操作步驟:

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

肌特異性烯chun化mei(MSE)elisa檢測試劑盒  英文名稱:MSE ELISA Kit,MSE,

饑餓su(GHRL)elisa檢測試劑盒  英文名稱:GHRL ELISA Kit,GHRL,

su皮質(zhì)激su5受體(MC5R)elisa檢測試劑盒  英文名稱:MC5R ELISA Kit,MC5R,

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suan皮膚su差向異構(gòu)mei(DSE)elisa檢測試劑盒  英文名稱:DSE ELISA Kit,DSE,

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酪蛋白α(CSN1)elisa檢測試劑盒  英文名稱:CSN1 ELISA Kit,CSN1,
PCNA細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)美托爾相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:50mg  英文名稱:

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