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細胞活力快速檢測試劑盒(Luminescent)

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  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-05-09
  • 廠商性質經(jīng)銷商
  • 入駐年限8
  • 實名認證已認證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9988
  • 人氣值266757
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上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務”的企業(yè)文化積極參與生物領域的技術創(chuàng)新和技術服務,力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務!


公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。






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貨號FS-X9604
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土壤性磷suanmei(S-AKP/ALP)測試盒
細胞活力快速檢測試劑盒(Luminescent) 產(chǎn)品詳情

中文名稱:細胞活力快速檢測試劑盒(Luminescent)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:500T

貨號:FS-X9604

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒是通過對ATP 進行定量測定來檢測培養(yǎng)物中活細胞數(shù)目的一種均質檢測方法。ATP 是活細胞新陳代謝的一個指標。細胞活力快速檢測試劑盒為多孔板而設計,是進行自動化高通量篩選(HTS)、細胞增殖和毒性分析的理想選擇。均質檢測步驟就是將單一試劑直接加入含有血清的培養(yǎng)細胞中,無需洗滌細胞、去除培養(yǎng)基或進行多步加樣操作。在384 孔板上,加入試劑并混合后,10 分鐘內,該系統(tǒng)可檢測到的每個孔內的細胞數(shù)為15 個。

均質檢測的" 加樣-混合-檢測" 的操作方案使得細胞裂解和產(chǎn)生的發(fā)光信號與存在ATP 量成正比,而ATP 量直接與培養(yǎng)物中的細胞數(shù)量成正比。細胞活力快速檢測試劑盒產(chǎn)生一種"輝光型" 的發(fā)光信號,半衰期一般大于5 小時,因細胞類型和培養(yǎng)基而異。由于信號半衰期長,不需要使用試劑自動進樣器,就可靈活地進行連續(xù)的或批量的多孔板處理。*的均質檢測方案避免了那些需要多個步驟的ATP 檢測方法可能會引入的誤差。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

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血管緊張suⅡ受體2(AT2R)elisa檢測試劑盒  英文名稱:AT2R ELISA Kit,AT2R,

血紅su加氧mei(HO)elisa檢測試劑盒  英文名稱:HO ELISA Kit,HO,

鋅轉運蛋白6(ZnT6)elisa檢測試劑盒  英文名稱:ZnT6 ELISA Kit,ZnT6,

纖溶mei原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa檢測試劑盒  英文名稱:PAI-1 ELISA Kit,PAI-1,

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mei3(CA3)elisa檢測試劑盒  英文名稱:CA3 ELISA Kit,CA3,

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