TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)正在熱銷的產(chǎn)品：脯氨suan（PRO）含量測試盒 規(guī)格：可見分光光度法 測試方法：可見分光光度法
蛋白質(zhì)羰基測試盒 規(guī)格：100管/48樣 測試方法：微量法
蛋白質(zhì)羰基測試盒 規(guī)格：50管/24樣 測試方法：紫外分光光度法
二an氧化mei測試盒 規(guī)格：100管/48樣 測試方法：微量法
二an氧化mei測試盒 規(guī)格：50管/24樣 測試方法：可見分
操作步驟：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit | 20次|50次 | FS-X9538 |
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細(xì)胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細(xì)胞或組織樣品，經(jīng)過生物su標(biāo)記和后續(xù)的DAB顯色等步驟，即可在普通光學(xué)顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。 試劑盒組分： TdT酶———————————40μl Biotin-dUTP————————960μl TdT酶稀釋液(選用)—————500μl Streptavidin-HRP——————22μl Streptavidin-HRP稀釋液———1ml DAB顯色液A————————6ml DAB顯色液B————————6ml 標(biāo)記反應(yīng)終止液——————6ml 細(xì)胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時抽提DNA進(jìn)行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化下加上生物su(Biotin)標(biāo)記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的Streptavidin(Streptavidin-HRP)結(jié)合，后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細(xì)胞，從而可以通過普通光學(xué)顯微鏡檢測到凋亡的細(xì)胞，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細(xì)胞凋亡的原理。 本試劑盒有如下優(yōu)點： (1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色強(qiáng)，可以在單細(xì)胞水平檢測到細(xì)胞凋亡，同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細(xì)胞凋亡。 (2)特異性好：TUNEL檢測時通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。 (3)快速：僅需約2-3個小時即可完成。 (4)應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。 TUNEL法特異性檢測細(xì)胞凋亡時產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。 極少數(shù)細(xì)胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，好同時檢測多個凋亡指標(biāo)。 儲存條件：-20℃。 |
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
性磷suanmei(ALP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：ALP ELISA Kit，ALP，
激su敏感脂肪mei(HSL)elisa檢測試劑盒 英文名稱：HSL ELISA Kit，HSL，
肌suan激mei同工meiBB(CK-BB)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CK-BB ELISA Kit，CK-BB，
紅細(xì)胞刺激因子(ESF)elisa檢測試劑盒 英文名稱：ESF ELISA Kit，ESF，
胱抑suF(CST7)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CST7 ELISA Kit，CST7，
過氧化mei(GSH-Px)elisa檢測試劑盒 英文名稱：GSH-Px ELISA Kit，GSH-Px，
髓鞘蛋白P0(MPZ)elisa檢測試劑盒 英文名稱：MPZ ELISA Kit，MPZ，
腎損傷分子1(Kim-1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：Kim-1 ELISA Kit，Kim-1，
瘦su受體(LEPR)elisa檢測試劑盒 英文名稱：LEPR ELISA Kit，LEPR，
傷寒抗體(St-Ab)elisa檢測試劑盒 英文名稱：St-Ab ELISA Kit，St-Ab，
妊娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)elisa檢測試劑盒 英文名稱：SP1/PSβ1-G ELISA Kit，SP1/PSβ1-G，
趨化因子(CCL5/RANTES)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CCL5/RANTES ELISA Kit，CCL5/RANTES，
前膠原C端肽mei(PCP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：PCP ELISA Kit，PCP，
牛兒基焦磷suan合mei(GGPS1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：GGPS1 ELISA Kit，GGPS1，
尿蛋白(UP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：UP ELISA Kit，UP，
末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)elisa檢測試劑盒 英文名稱：TCC C5b-9 ELISA Kit，TCC C5b-9，
美洲商陸su(PWM)elisa檢測試劑盒 英文名稱：PWM ELISA Kit，PWM，
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)百里酚標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Thymol
碘克沙chun相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱：
他zuo巴坦suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Tazobactam
異抗壞血suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱：Erythorbic Acid
拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Mesalamine
去jia替林鹽suan鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Nortriptyline Hydrochloride
5-ben基海因標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：5-Phenylhydantoin
辛普利鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Fosinopril Sodium
相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱：
ben海拉明檸檬suan鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Diphenhydramine Citrate
