Chk1抑制劑(CHIR-124)正在熱銷的產(chǎn)品：PA-IgM(Human Plaet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相關(guān)抗體IgM對(duì)氨鹽鹽 99%
FPA(Human fibrinopeptide A) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽A對(duì)苯二鹽鹽 AR,98.5%
Plg(Human Plasminogen) ELISA Kit 人纖溶
中文名稱：Chk1抑制劑(CHIR-124)
英文名稱：CHIR-124
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號(hào)：FS-X10871
產(chǎn)品介紹:
CHIR-124是一種有效的，選擇性的Chk1抑制劑，IC50值為0.3nM；同時(shí)可有效抑制PDGFR和FLT3，IC50值分別為6.6nM和5.8nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：405168-58-3 純度：98.77% 分子量：419.91 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
栗疫菌小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3Anti-RPL18 Antibody人維生K1(VK1)
細(xì)鏈格孢大鼠Ⅲ型前膠原肽Anti-RPL3 Antibody人維生K1(VK1)
胡椒樹青霉大鼠Ⅱ型膠原Anti-RPL28 Antibody人維生B12(VB12)
紅霉擬無枝菌人抗網(wǎng)硬蛋白抗體Anti-RPL30 Antibody人維生B12(VB12)
桑葉盤孢小鼠膽固Anti-RPL31 Antibody人維生D3(VD3)
金黃殼囊孢菌小鼠促黃體激Anti-RPL31 Antibody人維生D3(VD3)
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌人抗突變型瓜波形蛋白抗體Anti-RPL30 Antibody人維生D2(VD2)
微黃八疊球菌大鼠維生CAnti-RPL34 Antibody人維生D2(VD2)
德爾布有孢圓酵母大鼠維生B6Anti-RPL36 Antibody人維生E(VE)
檸檬色節(jié)桿菌小鼠血管緊張?jiān)?/span>Anti-RPL35 Antibody人維生E(VE)
絮邊蘑菇人抗髓磷脂抗體IgAAnti-RPL37 Antibody人維生A(VA)
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌小鼠熱休克蛋白60Anti-RPL37A Antibody人維生A(VA)
稀褶乳菇大鼠Ⅰ型膠原Anti-RPL36 Antibody人鳥交換因子(GEF)
大腸埃希菌人抗突變型瓜波形蛋白抗體Anti-RPL39 Antibody人鳥交換因子(GEF)
布魯氏菌病全乳環(huán)狀反應(yīng)抗原人抗髓磷脂抗體IgAAnti-RPL3L Antibody人維生D受體(VD R)
枯草芽孢桿菌大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽Anti-RPL39L Antibody人維生D受體(VD R)
轉(zhuǎn)錄因子THOC2抗體竹黃（斜面）胃癌耐藥細(xì)胞株
睪丸特異蛋白抗體膠孢（斜面）原代細(xì)胞
5色羥化2抗體溶藻弧菌人膀胱成纖維細(xì)胞
硫氧還蛋白11抗體鏈格孢菌（斜面）大鼠軟骨細(xì)胞
Chk1抑制劑(CHIR-124)Penicillium 卵黃瓊脂培養(yǎng)基弓形蟲抗體
干巴* 檢定培養(yǎng)基8號(hào)副傷門氏抗體
大腸埃希 檢定培養(yǎng)基7號(hào)低氧誘導(dǎo)因子1
季也蒙畢赤酵母 檢定培養(yǎng)基4號(hào)瘟病非結(jié)構(gòu)蛋白NS2抗體
柑橘炭疽盤孢 葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基硫雌酮
雅致放射毛霉 酪胨瓊脂前列腺F2a
食砜節(jié)桿 甘露鹽瓊脂甲狀旁腺
粉被蟲草 普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2)25羥基維生D3
美澳型核果褐腐病 肉湯瓊脂培養(yǎng)基肉絳蟲
釀酒酵母 玫瑰紅鈉瓊脂白介2受體α
黃桿 檢定培養(yǎng)基3號(hào)囊尾蚴IgG抗體
生活飲用水 pH 值 檢定培養(yǎng)基2號(hào)（低pH）胰脂肪
黏液桿 檢定培養(yǎng)基2號(hào)（高pH）圓環(huán)病抗體
擬莖點(diǎn)霉 檢定培養(yǎng)基1號(hào)（低pH)戊肝病抗體
*蛹蟲草 檢定培養(yǎng)基1號(hào)(高pH)流感病抗體
