鏈霉親和素磁珠

商品屬性：

商品介紹：

是一種高度均勻的超順磁性微球，表面包覆著高密度的超純鏈霉親和素（＞97%）。微球經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)、測(cè)試和質(zhì)量控制，可用于免疫沉淀、細(xì)胞分選、快速單步捕獲生物su化分子，如 DNA、RNA、抗體或細(xì)胞裂解物或雜交反應(yīng)中的蛋白質(zhì)等。鏈霉親和素（或抗生素多倍體）和生物su之間的相互作用表現(xiàn)出已知的最高非共價(jià)相互作用之一?？股飐u、鏈霉親和素、單體抗生物su及其類(lèi)似物已成為探針和親和配體的有力工具，在生化分析、診斷、親和純化和藥物傳遞等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。鏈霉親和素是一種四聚體生物su結(jié)合蛋白，源于鏈霉菌親和素 II，質(zhì)量為 60000 道爾頓。鏈霉親和素不含碳水化合物，pI 較低，非特異性結(jié)合程度較低，使鏈霉親和素成為許多檢測(cè)系統(tǒng)的理想試劑選擇。

產(chǎn)品特點(diǎn): 使用鏈霉親和素-生物su結(jié)合系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)和益處：

·親和力：鏈霉親和素是同源四聚體，具有較高的生物su結(jié)合親和力，具有KD~10?14 米。

·高穩(wěn)定性：生物su結(jié)合復(fù)合物具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，可抵抗 pH、溫度（2°C 和40°C）、苛刻的有機(jī)溶劑、變性劑（如氯化胍）、洗滌劑（如 SDS）和蛋白水解酶。

·突出的選擇性和特異性：生物su和鏈霉親和素的相互作用具有高度的特異性，確保了較低的非特異性結(jié)合。

·高靈敏度：高穩(wěn)定性和特異性確保了高檢測(cè)靈敏度。

·非常靈活：生物su的小尺寸和顯著穩(wěn)定性被證明非常適合相對(duì)容易地并入各種分子，例如合成聚合物、熒光團(tuán)、小分子或生物分子中的特定位置，從而對(duì)共軛生物分子的結(jié)構(gòu)和功能施加最小的擾動(dòng)。

鏈霉親和素磁性微球的優(yōu)點(diǎn)：

·快速、簡(jiǎn)單且一步到位的高通量程序：消除了柱狀物或過(guò)濾器，或重復(fù)費(fèi)力的移液或 離心（圖 1） ·高結(jié)合能力 ·表現(xiàn)出較低的非特異性結(jié)合 ·可擴(kuò)展-可輕松調(diào)整樣本大小和自動(dòng)化

所需材料 ·

Binding Buffer: 1x PBS, 0.1% BSA, pH 7.4 ·磁力分離器（適用于手動(dòng)操作）： 根據(jù)實(shí)驗(yàn)時(shí)生物樣品的體積，使用者可以選擇以下不同型號(hào)的磁力分離器： 8孔磁力架 可以容納8個(gè)單獨(dú)的1.5-2.0 ml 離心管 ; 24孔磁力架可以容納24個(gè)單獨(dú)的1.5-2.0 ml離心管; 4孔磁力-15可以容納 4個(gè)單獨(dú)的15ml離心管; 4孔磁力架-50可以容納四個(gè)單獨(dú)的50 ml離心 管。

操作過(guò)程：

注: · 該方案是一種通用親和純化程序。為了獲得最佳結(jié)果，每個(gè)用戶(hù)應(yīng)確定純化單個(gè)目標(biāo)蛋白的最佳工作條件。

·根據(jù)粗樣品中目標(biāo)生物su化分子的數(shù)量（基于珠子結(jié)合能力），優(yōu)化每種應(yīng)用中使用的珠子數(shù)量。使用過(guò)多的磁珠會(huì)導(dǎo)致背景較高，而使用過(guò)少的磁珠會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量較低。

1. 將最佳量的珠子轉(zhuǎn)移到離心管中。將管放在磁力架上1-3分鐘。在管留在分離器上的同時(shí)去除上清液。

2. 取下試管，用5倍體積的 1x Binding/Washing Buffer通過(guò)渦流清洗珠子30秒。將試管置于室溫下1-3分鐘。將管放在磁力架上1-3分鐘。在管留在分離器上的同時(shí)去除上清液。

3. 重復(fù)步驟二兩次。

向含有目標(biāo)分子的粗樣品中加入洗滌過(guò)的珠子，并在室溫或所需溫度下培養(yǎng)1-2小時(shí)（溫度越低，培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)）。

注: 強(qiáng)烈建議進(jìn)行滴定以?xún)?yōu)化培養(yǎng)時(shí)間。更長(zhǎng)時(shí)間的孵育可能導(dǎo)致更高的背景。

4. 如步驟 2 所述清洗磁珠，直到 280 nm 處洗脫液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。

注: 添加更高濃度的鹽、非離子洗滌劑和還原劑可降低非特異性背景。例如，向洗滌緩沖液中添加NaCl（高達(dá)1-1.5 M）、0.1-0.5%的非離子洗滌劑，如Triton X 100或吐溫20。

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