Chk1抑制劑(LY2606368)正在熱銷的產(chǎn)品：SAP-1/FITC 熒光標(biāo)記抗突觸抗體IgG[Tyr4] Bombesin ≥97% (HPLC)
Synapsin I /FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)突觸1抗體IgG[D-Phe7]-Bradykinin acetate salt
Syntrophins/SNTA1/Syntrophin α1/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：LY2606368 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg LY2606368是一種有效的，選擇性的，ATP競爭性的Chk1抑制劑，Ki值為0.9nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1234015-52-1 別名：Prexasertib 純度：99.13% 分子量：365.39 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：Chk1抑制劑(LY2606368)
英文名稱：LY2606368
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10371
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
解脂亞羅酵母腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體Human MBP/MBL(Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) 甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)
植物乳桿菌神經(jīng)激肽A抗體Human IgG(Immunoglobulin G) 甲狀旁腺激1受體(PTH1R)
松衫暗孔菌磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體Human S100A1/S100(Protein S100-A1) 甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)
側(cè)孢短芽孢桿菌磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human FE(Ferritin) 甲狀旁腺激(PTH)
短芽孢桿菌核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human sTfR1(Soluble Transferrin Receptor1) 甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
釀膿鏈球菌膜相關(guān)蛋白Numb抗體Human FPA(Fibrinopeptide A) 甲酰甲硫(fMet)
茄鏈格孢谷受體2A抗體Human TF(Transferrin) 甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)
小煤炱菌屬磷化谷受體2B抗體Human AFP(alpha Fetoprotein) 甲基化(Methylase)
羊邊蟲（綿羊無漿體—永壽株）谷受體2B抗體Human C-P(C-Peptide) 甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)
下彎巴克斯霉磷化核仁磷蛋白抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) 喋呤(MTX)
黃綠木霉磷化核仁磷蛋白抗體Human PI(Proinsulin) 己糖激3(HK3)
黃海芽孢桿菌磷化核仁磷蛋白抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) 己糖激(HK)
雙孢蘑菇（可訂購）核因子κB抑制蛋白β抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) 幾丁質(zhì)3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)
絲狀支原體山羊亞種磷化谷受體2A抗體Human C-P(C-Peptide) 幾丁質(zhì)1(殼三糖)(CHIT1)
晶粒鬼傘間質(zhì)衍化因子受體1抗體Human PI(Proinsulin) 集落激因子(CSF)
青色鏈霉菌神經(jīng)分化因子2抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) 集蛋白亞家族成員11(COLEC11)
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:3000防己諾林堿
枯草芽胞桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:10000粉防己堿
楚氏喜鹽芽胞桿菌Halobacillus│trueperi 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:90000輔Q10
Chk1抑制劑(LY2606368)成團(tuán)泛 2,2-二甲基丁周期E
栗疫 N-叔丁氧羰基-L-絲周期抑制蛋白p27;Kip1
釀酒酵母 2-酮纖連蛋白
香菇 乙烷磺纖溶抗纖溶復(fù)合物
ATCC 14028 叔丁基鋰?yán)w溶原
土生類諾卡氏 硫胍纖溶原激活物抑制因子
葡萄糖桿屬 偶氮甲堿H纖溶原激活物抑制因子1
桔青霉 基膦纖溶抑制因子;凝血激活的纖溶抑制物
黃色單胞 1-Boc-吡咯烷-3-甲纖維蛋白肽A
美澳型核果褐腐病 反式-3-(基硅基)烯纖維蛋白原
釀酒酵母 外-6-羥基托品酮纖維蛋白原
Glarea lozoyensis 4-硅基-3-丁炔-2-酮酰腺二核磷
釀酒酵母 2--5-甲基吡?；?膽固?；D(zhuǎn)移
紫產(chǎn)色鏈孢囊 2,6-二氟二苯甲酮線粒體膜通道孔
鑲邊鏈霉 戊丁酯線粒體肽蛋亞砜還原
