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名稱 | CT26.WT (小鼠結腸癌細胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | CT26WT |
種屬 | 小鼠 |
年齡（性別） | 不詳 |
組織來源 | 器官：結腸；品系：BALB/c；疾?。喊?/span> |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
背景描述 | CT26細胞是以N-亞硝基-N-甲基氨基甲酸酯(NNMU)誘導形成的未分化結腸癌細胞株，它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關抗原(TAA)β-半乳糖苷酶(β-gal)的lacZ基因的逆轉錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉染CT26.WT細胞，得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25細胞表達了典型的TAA-β-半乳糖苷酶，在正常小鼠中CT26.CL25細胞和CT26.WT細胞的生長率與致死率也保持基本一致。CT26.WT細胞與CT26.CL25細胞一起可用作測試免疫-治療程序的模型，并用于研究宿主免疫反應。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in BALB/c mice. Mice inoculated, subcutaneously, developed lethal tumors at 80% frequency with 1×10^3 cells and at 100% with 1×10^4 cells. Pulmonary metastases developed when mice were inoculated, intravenously, with 1×10^4 cells. |
抗原表達情況 | H-2d |
保藏機構 | ATCC; CRL-2638 BCRC; 60447 |
細胞傳代：
1. CT26小鼠結腸癌細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉染。
細胞轉染：
1. 轉染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA 質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。
線粒體抗病毒信號MAVS蛋白封閉多肽 | 人副流感病毒3型PCR檢測試劑盒 |
伽氏疏螺旋體（伽氏包柔螺旋體）PCR試劑盒 | 鈣黏蛋白20ELISA試劑盒 |
人雌二醇(E2)ELISA Kit | 分泌球蛋白家族2A成員2ELISA試劑盒 |
人Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)試劑盒ELISA | 內皮su3ELISA試劑盒 |
人胰高血糖su樣肽1(GLP-1)ELISA檢測試劑盒 | 分揀連接蛋白1ELISA試劑盒 |
人N-甲基-D-天冬氨suan受體(NMDAR)ELISA試劑盒 | 組織因子通道抑制因子2ELISA試劑盒 |
重組人白細胞介su-17 (活性的) | 寄生曲霉PCR試劑盒 |
光導蛋白樣蛋白PDCL封閉多肽 | 綿羊鞭蟲PCR檢測試劑盒 |
DNA拓普西異構meiⅡA封閉多肽 | 腺病毒F型PCR試劑盒 |
著絲粒蛋白P封閉多肽 | 豬細小病毒PCR檢測試劑盒 |
DPY30蛋白封閉多肽 | 牛血吸蟲PCR試劑盒 |
鉀離子通道蛋白7封閉多肽 | CT26小鼠結腸癌細胞綿羊星狀病毒型PCR檢測試劑盒 |
肌動蛋白樣蛋白6A封閉多肽 | 綿羊肺腺瘤病病毒RT-PCR試劑盒 |
鋅指蛋白79封閉多肽 | 牛仰口線蟲PCR試劑盒 |
諾如病毒蛋白封閉多肽 | 牛細小病毒（BPV）PCR檢測試劑盒（熒光-PCR法） |
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。
